銅藍(lán)蛋白(CP)檢測試劑盒(胺比色法)的計(jì)算

產(chǎn)品簡介:

銅藍(lán)蛋白(Ceruloplasmin，CP)又稱為亞鐵氧化酶或銅藍(lán)蛋白氧化酶，是存在于肝臟、腎臟、血清等中的a2-糖蛋白，每個(gè) CP 分子含有 6~8 個(gè)銅原子，其中 Cu2+和 Cu1+各占一半，故呈藍(lán)色。CP 具有鐵氧化還原酶活性，能使 Fe2+氧化為 Fe3+，CP 酶活性并非專一，可與 Fe2+、聯(lián)苯胺、二甲基二苯胺、聯(lián)大茴香胺等底物反應(yīng)，可據(jù)此檢測 CP 活性。

銅藍(lán)蛋白(CP)檢測試劑盒(胺比色法)其檢測原理是銅藍(lán)蛋白在弱酸條件下 CP催化胺底物，生成淡棕黃色產(chǎn)物，終止反應(yīng)后生成紫紅色溶液，通過分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀檢測 540nm 處吸光度，根據(jù)公式可計(jì)算出 CP 活性，主要用于檢測血清、血漿等樣品中的銅藍(lán)蛋白，50T 可檢測23~24 個(gè)樣品。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

自備材料:1 、蒸餾水2、水浴鍋或恒溫箱3、比色杯或96 孔板4、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀操作步驟(僅供參考):1準(zhǔn)備樣品:@血漿、血清和尿液樣品: 血漿、血清按照常規(guī)方法制備，可以直接用于該試劑盒的測定，尿液通常也可以直接用于測定，-20“C凍存，用于 CP 的檢測。@細(xì)胞或組織樣品: 取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行勻漿，低速離心取上清，-20“C凍存，用于CP 的檢測

計(jì)算: CP 國際活力單位的定義 : 在最適 pH 和底物濃度下，1min 能催化 1pmol 底物所需的 CP 酶量為一個(gè)國際活力單位。其計(jì)算公式如下 :

CP活力(IU/L)=(A15mi-Asmn)x6*1000/(10x0.05x9.46)=(Asmin-Asmh)x1268式中:Asmin=測定管I的吸光度

415min=測定管的吸光度

6=反應(yīng)液總體積(ml)

10=孵育時(shí)間差值(min)=15-50.05=樣品用量(ml)9.46=吸光系數(shù)

注事事項(xiàng)

待測樣品一般采用血清，4C可穩(wěn)定 3天，20”C可穩(wěn)定1個(gè)月12胺基質(zhì)液應(yīng)注意防止揮發(fā)，可以-20”C保存，12 個(gè)月有效

用含有檸檬酸、EDTA 抗凝血對(duì)本法測定有一定干擾

實(shí)驗(yàn)全程注意控制溫度和 pH 值

5、加入 CP 終止液后，應(yīng)立即混勻以終止酶促反應(yīng)

6、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作

銅藍(lán)蛋白(CP)檢測試劑盒(胺比色法)的計(jì)算