半胱氨酸(Cys)測試盒的操作過程
( Cysteime Kit 法)
一、測定原理
Cys 還原磷鎢酸生成鎢藍,在600nm 處有吸收峰:通過600nm 吸光度,計算Cys 含量。
二、儀器設(shè)備及需自備試劑
可見光分光光度計、低溫離心機、微量移液槍、磷酸和蒸溜水
三、試劑組成:(50T/48 樣)
試劑一:液體x1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體x1 瓶,4℃保存
試劑三:粉劑x1 瓶,4℃保存。提前一天向試劑三中加5ml蒸留水充分溶解,再加磷酸1.25ml,
混勻后蓋緊(防止水分散失) 沸水浴2h; 冷卻后加20mI蒸餾水,4℃保存2周
標(biāo)準品:1umol/ml 標(biāo)準液x1 瓶,4℃保存。
四、操作步驟
1.半胱氨酸提取:
樣本提取詳見試劑盒內(nèi)說明書。測定組織和細胞同時需要測定蛋白濃度?捎帽舅
A045-2總蛋白定量測試盒(考馬斯亮藍法)或者A045-3、A045-4總蛋白定量測試盒 (BCA
法)進行蛋白濃度的測定。
2. 操作表
半胱氨酸(Cys)測試盒的操作過程
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