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免疫組化實驗應(yīng)該如何分析
發(fā)布時間:2023/11/20 10:20:59 已瀏覽次數(shù): 207 次

 □面密度,累積光密度值(IOD)/待測區(qū)域組織面積:累積光密度值是所有陽性信號光密度的積分,除以待測區(qū)域組織面積可反映陽性多少和深淺,成正比。優(yōu)點是既考慮了陽性的面積以及陽性的深淺,且不受待測組織大小的影響。

□陽性率,陽性細胞數(shù)/總細胞數(shù)分析陽性細胞數(shù)占總細胞數(shù)的占比。反映陽性細胞數(shù)量比率高低,成正比。優(yōu)點適用于細胞類型較單一的情況。比如腫瘤組織中KI67指標腫瘤細胞增值比率,脾臟組織內(nèi)CD3指標T細胞比率等。

□陽性細胞密度,陽性細胞數(shù)/待測區(qū)域組織面積分析陽性細胞數(shù)占待測區(qū)域組織面積之比。反映單位面積內(nèi)陽性細胞個數(shù),成正比。優(yōu)點不受多種細胞類型數(shù)量影響。常用在浸潤型的炎性細胞中,比如肝組織中某類炎性細胞占比,代表性指標MPO、CD68等。

陽性強度,各陽性點顏色深淺的平均值:反應(yīng)整張片子或者某個區(qū)域陽性的平均深淺度。明場為平均光密度(average optical density),暗場為平均強度(average intensity),數(shù)值越大陽性程度越強。適用性廣,由于沒有考慮陽性面積,在極端情況下會出現(xiàn),陽性極少且顏色深時陽性強度值高,陽性點多且顏色淺時陽性強度值低?梢越Y(jié)合陽性面積一起評價。

□陽性面積比,陽性面積/待測區(qū)域組織面積:不考慮陽性深淺的變化,單純的比較陽性面積占比。

MVD,微血管數(shù)量/視野:單位面積內(nèi)微血管數(shù)量,對于微血管的識別不需具備完整的管腔和紅細胞,只要有明顯的血管內(nèi)皮細胞染色、并且能與相鄰的血管、實質(zhì)細胞以及間質(zhì)成分相分隔的,就可視為一個獨立的血管,分辨不清、管腔直徑>8個紅細胞直徑的血管以及具有較厚肌層的血管不納入計數(shù)內(nèi)。常用指標CD31、CD34。此項只能分析高倍視野的圖片。

IRS評分:對免疫組化切片中的染色程度(0-3分)以及陽性率(0-4分)分別評分后相乘得到綜合評分(0-12分)。具體如下,染色強度以目的細胞呈現(xiàn)染色特性計分:無著色為0分,淡黃色為1分,棕黃色為2分,棕褐色為3分;以細胞陽性比率進行計分:0~5%為0分,6%~25%為1分,26%~50%為2分,51%~75%為3分,>75%為4分。綜合評分可劃分陽性高低后進行統(tǒng)計,常用于癌和癌旁的芯片生存分析中。

H-Score:即 Histochemistry score (組織化學評分)的縮寫,是處理免疫組化的一種組織學評分方法,將每張切片內(nèi)陽性數(shù)量及其染色強度轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的數(shù)值,達到對組織染色半定量的目的。H-Score(H-SCORE=∑(pi×i)=(percentage of weak intensity×1)+(percentage of moderate intensity×2)+(percentage of strong intensity×3),式中pi表示陽性信號像素面積/細胞數(shù)量占比;i代表著色強度)。H-score為0-300之間的數(shù)據(jù),數(shù)據(jù)越大說明綜合陽性強度越強。

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