如何制作雞紅細(xì)胞懸液

01、心臟采血

雞右側(cè)臥自然保定，從膝關(guān)節(jié)稍前下方處垂直地面進(jìn)針采血。

要點(diǎn)：

（1）采血前雞盡可能處于自然狀態(tài)。

（2）垂直地面進(jìn)針：刺入正確時(shí)，松開(kāi)注射器，會(huì)看到注射器隨心臟的自然跳動(dòng)。

（3）先把針全部刺入，如采不出，可以一邊向上提注射器，一邊采血，注意向上提注射器時(shí)速度要慢。

02、翅靜脈采血

（1）捏住近心端，讓翅靜脈臌起。

（2）針頭斜面向上，小角度刺入翅靜脈中，待出現(xiàn)回血時(shí)，松開(kāi)近心端，固定好針頭進(jìn)行采血即可。

雞紅細(xì)胞如何制備？

以1%雞紅細(xì)胞為例

把采集過(guò)動(dòng)物血液的采血管依次放入卡套內(nèi)，并將放置于離心機(jī)對(duì)角線的兩個(gè)卡套配平，使其重量相同(相差不超過(guò)0.2g)，低溫離心機(jī)4000r/min，離心10分鐘。離心機(jī)的使用參照離心機(jī)的操作規(guī)程。

1、清洗紅細(xì)胞

1.1 于超凈臺(tái)內(nèi)采集上清液置于無(wú)菌血清瓶中即為血漿（不同的抗凝劑需做好標(biāo)記），-20℃冷凍保存于固定區(qū)域

1.2 小心吸取紅細(xì)胞上方的白細(xì)胞層，并棄去。

1.3 在每根吸除過(guò)白細(xì)胞的采血管中，加入和壓積紅細(xì)胞等體積的無(wú)菌1×PBS，并輕輕吹打混勻。

1.4 將混勻好的紅細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)至15ml無(wú)菌離心管中，低溫離心機(jī)2000r/min離心10分鐘。

1.5 吸取上清液并棄去。

1.6 加入和壓積紅細(xì)胞等體積的無(wú)菌1×PBS，并輕輕吹打混勻。低溫離心機(jī)2000r/min離心10分鐘。重復(fù)1.5-1.6步驟一次，吸取上清液并棄去即為紅細(xì)胞原液。

2、制作紅細(xì)胞懸液

根據(jù)所需的紅細(xì)胞百分比濃度，在血清瓶中加適量2-8℃保存的阿氏液和紅細(xì)胞原液，制成1%的雞紅細(xì)胞懸液。

【應(yīng)用】 ：

雞紅細(xì)胞懸液可以用于科研、教學(xué)實(shí)驗(yàn)，如總補(bǔ)體溶血活性（CH50）檢測(cè)、輻射紅細(xì)胞溶解實(shí)驗(yàn)、溶血空斑實(shí)驗(yàn)等，以及用于紅細(xì)胞間接凝集試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、T淋巴細(xì)胞E花環(huán)試驗(yàn)、制作致敏細(xì)胞、免疫注射抗體、制作血平板等試驗(yàn)。

【注意事項(xiàng)】 ：

1、注意不可凍融，每天需輕輕顛倒，將紅細(xì)胞輕輕搖起。

2、長(zhǎng)途運(yùn)輸過(guò)程中劇烈震蕩可能導(dǎo)致本產(chǎn)品出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，可以通過(guò)離心后PBS洗滌來(lái)除去破碎的紅細(xì)胞。

3、注意無(wú)菌操作，低溫保存，開(kāi)封后請(qǐng)盡快使用完。

4、避免超長(zhǎng)時(shí)間超遠(yuǎn)距離運(yùn)輸。

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