信帆生物：常見的ELISA試劑盒的兩種反應(yīng)方法
間接法
間接法常用於檢測抗體，一般之操作步驟為：間接法常用于檢測抗體，一般之操作步驟為：
- 將已知之抗原固著於塑膠孔盤上，完成後洗去多餘之抗原將已知之抗原固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余之抗原
- 加入待測檢體，檢體中若含有待測之一次抗體，則其會與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié)加入待測檢體，檢體中若含有待測之一次抗體，則其會與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié)
- 洗去多餘待測檢體，加入帶有酵素之二次抗體，與待測之一次抗體鍵結(jié)洗去多余待測檢體，加入帶有酵素之二次抗體，與待測之一次抗體鍵結(jié)
- 洗去多餘未鍵結(jié)二次抗體，加入酵素受質(zhì)使酵素呈色，藉儀器（ELISA reader）測定塑膠盤中的吸光值（OD值），以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測抗原的含量。洗去多余未鍵結(jié)二次抗體，加入酵素受質(zhì)使酵素呈色，借儀器（ELISA reader）測定塑膠盤中的吸光值（OD值），以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測抗原的含量。
競爭法
競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機(jī)制，一般用於檢測小分子抗原，其操作步驟為：競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機(jī)制，一般用于檢測小分子抗原，其操作步驟為：
- 將具有專一性之抗體固著於塑膠孔盤上，完成後洗去多餘抗體將具有專一性之抗體固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體
- 加入待測檢體，使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)加入待測檢體，使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)
- 加入帶有酵素之抗原，此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)，由於塑膠孔盤上固著的抗體數(shù)量有限，因此當(dāng)檢體中抗原的量越多，則帶有酵素之抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少，亦即，兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結(jié)，即所謂競爭法之由來。加入帶有酵素之抗原，此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)，由于塑膠孔盤上固著的抗體數(shù)量有限，因此當(dāng)檢體中抗原的量越多，則帶有酵素之抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少，亦即，兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結(jié)，即所謂競爭法之由來。
- 洗去檢體與帶有酵素之抗原，加入酵素受質(zhì)使酵素呈色，當(dāng)檢體中抗原量越多，代表塑膠孔盤內(nèi)留下之帶有酵素的抗原越少，顯色也就越淺。洗去檢體與帶有酵素之抗原，加入酵素受質(zhì)使酵素呈色，當(dāng)檢體中抗原量越多，代表塑膠孔盤內(nèi)留下之帶有酵素的抗原越少，顯色也就越淺。
當(dāng)需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原，或是不易得到足夠的純化抗體以固著於孔盤上時(shí)，一般會考慮使用競爭法ELISA。當(dāng)需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原，或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤上時(shí)，一般會考慮使用競爭法ELISA。
信帆生物：常見的ELISA試劑盒的兩種反應(yīng)方法
