CHIP實驗的實驗流程和樣本運輸要求
上海信帆生物提供CHIP實驗代測服務(wù),實驗流程如下:
樣本處理-超聲檢測-input檢測及反饋-免疫沉淀-洗脫-產(chǎn)物檢測-結(jié)果分析
送樣運輸要求:
只接受細胞樣本,細胞量要求為10^7以上,外地需要按照預(yù)處理步驟處理細胞,然后收集細胞沉淀,干冰運輸;
抗體要求為CHIP級別,-20運輸;
引物可由客戶提供,干粉常溫運輸,液體-20運輸;也可以提供轉(zhuǎn)錄因子和啟動子以及樣本種屬信息,我們進行預(yù)測并設(shè)計合成引物。
外地運輸預(yù)處理步驟:
1、取出1平皿細胞(10cm平皿),加入190ul 37%甲醛,使甲醛的終濃度為1%(培養(yǎng)基共有7ml);
2、37攝氏度孵育孵育10min;(恒溫培養(yǎng)箱,培養(yǎng)箱要提前開啟)
3、終止交聯(lián):按350ul 2.5M甘氨酸于平皿中,混勻后,在室溫下放置5min;
4、去掉培養(yǎng)基,用預(yù)冷的PBS清洗細胞2-3次;
5、收集細胞,2000g離心5min,去上清;
6、細胞沉淀,干冰運輸。
CHIP實驗的實驗流程和樣本運輸要求