實驗培訓(xùn)- 如何保證樣品的質(zhì)量
決定樣品質(zhì)量的因素包括材料的選擇、材料的培養(yǎng)、材料的處理和取樣以及樣品保存。
樣品不合格，后續(xù)測定做得再好也是零，甚至是負數(shù)，因為浪費了大量時間、樣品和經(jīng)費！
樣品是最寶貴的，因為試劑等可以再買，一旦樣品質(zhì)量不行，或者用完了，就只有重新培養(yǎng)、處理和取樣，這個過程會比較長！
（1）材料的選擇：選擇合適的研究問題的材料。
細分為：遺傳背景明確，不能混雜；如果是轉(zhuǎn)基因材料，先要確認是否在擬研究的器官或者組織中表達；材料是否容易大批量培養(yǎng)，擬取樣部位是否容易區(qū)分和獲得，從而決定了能否得到足夠的樣品，供后期測定用。
（2）材料培養(yǎng)：查閱文獻，結(jié)合材料特性，根據(jù)所研究的問題，確定合適的培養(yǎng)條件。原則保證材料正常生長發(fā)育，而且盡可能控制環(huán)境條件穩(wěn)定一致。
例如溫度、水分、CO2濃度、培養(yǎng)基等，不要過于信任控溫儀器，要實際測定并且經(jīng)常觀察是否為要求的溫度以及溫度變化是否平穩(wěn)。
（3）材料處理：確定設(shè)計處理方式、處理部位、處理時期和處理濃度等處理組合。
通過預(yù)實驗，一方面要找出最佳處理（即該處理與對照相比，出現(xiàn)了預(yù)期中最典型的生物學(xué)現(xiàn)象），這樣可以大大減少處理的種類；另一方面還可以確定從最佳處理開始到典型生物學(xué)現(xiàn)象出現(xiàn)的時長，為設(shè)計取樣間隔提供參考。這樣，在正式實驗時，僅僅設(shè)計對照和最佳處理兩組即可，從而大大減少材料培養(yǎng)與處理、取樣和測定的工作量�？梢�，預(yù)實驗非常重要！
（4）取樣：典型性、代表性、間隔和數(shù)量。
取樣典型性是指，與對照組相比，處理組一定要呈現(xiàn)預(yù)期的生物學(xué)現(xiàn)象或者癥狀，取樣時要有意識地選取具備典型生物學(xué)現(xiàn)象或者癥狀的樣品，通俗地講就是處理組的樣品與對照組樣品相比一定要存在顯著差異，而且最好差異程度近似的那些個體或者器官或者組織。否則，進一步進行后續(xù)測定是沒有意義的。
取樣的代表性是指，實際測定所取的樣品部分一定要能夠代表整個樣品狀況。否則測定結(jié)果無法代表整個樣品。隨意取樣品的一部分進行測定，常常還會導(dǎo)致測定結(jié)果變化不規(guī)律。例如，土壤樣品可以混勻后按照對角線法依次減少樣品量，即按照二分之一、四分之一、八分之一等，直到剩下的樣品量符合測定所需量；葉片或者果實樣品，可以通過對稱軸法，依次去掉二分之一、四分之一、八分之一等，直到剩下剩下的樣品量符合測定所需量。再如葉片或者果實等樣品，可以根據(jù)對稱軸來取樣。如果樣品數(shù)量不少很多，還可以先全部液氮研磨后，再進行分裝，這樣就能充分保證取樣的代表性。
取樣間隔：取樣期是指從處理開始，到處理組出現(xiàn)預(yù)期中的典型生物學(xué)現(xiàn)象出現(xiàn)為止；除非有明顯發(fā)育階段的變化，或者有參考文獻，否則可以考慮等間隔取樣，即把整個取樣期等時間間隔進行取樣。一般應(yīng)該至少劃分為五個時期以上進行取樣。在可能的情況下應(yīng)該盡可能取樣時期間隔小一些，以確保取到指標(biāo)變化拐點的樣品。
取樣數(shù)量：指每種處理（包括對照組）每次取樣品的數(shù)量。一般而言，只要條件許可，就應(yīng)該盡可能多取，這樣可以保持后期測定的需要（寧可用不上，也不能不夠測定用）。因為測定過程中可能因為各種各樣的原因?qū)е聹y定失敗，或者對測定結(jié)果有疑問，這樣可以重新測定，或者不測定一些疑問的樣品。另外，還可以待測定結(jié)果出來后，馬上進行分析，進一步進行新的指標(biāo)測定。因為生物樣品不同批次之間可能存在差異，同一批樣品進行測定，就可以有效減少樣品差異。
（5）樣品規(guī)范保存：樣品保存過程中要盡最大可能減少樣品中擬測定指標(biāo)發(fā)生變化。
有條件的情況下，樣品取好后立即進行液氮速凍。如果不具備條件，也應(yīng)該盡可能縮短樣品進入超低溫冰箱的時間。對于大體積樣品，應(yīng)該進行分割，分別小包裝后再液氮速凍或者放入超低溫冰箱。如果需要測定多個指標(biāo)，應(yīng)該把樣品分成小包裝再凍存，免得反復(fù)從冰箱取出和放回，避免反復(fù)凍融對樣品的破壞。樣品放進冰箱之前，要檢查冰箱是否正常工作、冰箱設(shè)定溫度是否正常和冰箱內(nèi)樣品是否過多，樣品過多、樣品體積過大或者樣品排放不整齊（沒有留出通風(fēng)通道），會嚴(yán)重影響冰箱制冷效果，不能確保樣品迅速達到所需冷凍溫度，造成樣品變質(zhì)！另外，樣品放進冰箱后不是就萬事大吉了，停電或者別人拿去樣品時，都可能造成樣品變質(zhì)，等你從冰箱拿出樣品時，你會發(fā)現(xiàn)樣品仍然凍得硬邦邦的，但是其實樣品已經(jīng)變質(zhì)了。
