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信帆生物告訴您如何選擇測定指標
發(fā)布時間:2023/6/12 16:58:42 已瀏覽次數(shù): 385 次

信帆生物告訴您如何選擇測定指標

對于研究新手來說, 常常直到寫論文時才發(fā)現(xiàn),因為指標選擇不當,雖然測定了很多指標,但是由于這些指標相互之間關(guān)聯(lián)性不強,不能相互配合得出一個明確結(jié)論,導致論文都沒法寫。此前的時間、試劑和實驗材料就全部浪費了。


(1)包括四個層級的不同指標:生物學現(xiàn)象、非蛋白質(zhì)的物質(zhì)變化、蛋白質(zhì)變化和基因變化。
       就某種生物學現(xiàn)象而言,從因果關(guān)系鏈來看,基因水平的變化,引起蛋白質(zhì)水平的變化;蛋白質(zhì)水平的變化引起物質(zhì)運輸水平的變化(離子通道或者載體)或者引起代謝水平(糖、脂類、生理活性物質(zhì)等);物質(zhì)運輸或者代謝水平的變化引起生理功能的變化;生理功能的變化最終引起特定生物學現(xiàn)象的產(chǎn)生或者消失。那么,要做一篇高水平的研究論文,就得包括以上幾個層級:分子生物學、生物化學、生理學和形態(tài)學相應(yīng)的指標,才能真正闡明某個生物學現(xiàn)象的機制。
(2)研究順序應(yīng)該是形態(tài)學、生理學、生物化學、分子生物學。這樣,前一步研究成為下一步研究的基礎(chǔ),不至于因為茫無頭緒而走偏,做無用功!
A. 通過預實驗,明確形態(tài)學變化(生物學現(xiàn)象)。接下來的研究才有意義,為生理學研究提供線索,不至于茫無頭緒,找偏研究方向。
B. 測定產(chǎn)生該生物學現(xiàn)象的可能相關(guān)的生理學指標。為生物化學研究提供線索。
C. 測定直接相關(guān)的物質(zhì)種類與含量水平的變化。相對目標明確,也比較好測定。
D. 參與上述物質(zhì)變化調(diào)控的蛋白質(zhì)種類和水平的變化,也包括修飾狀況?梢愿鶕(jù)C的測定結(jié)果來推測D需要測定的指標。為進一步基因水平的研究提供線索。
E. 參與上述蛋白質(zhì)變化調(diào)控的基因及其表達變化。
(3)如何選擇密切相關(guān)的指標
對于研究而言,切忌大而空,這樣難以得出明確的結(jié)論,最后論文都沒辦法寫。正確的做法是切入點要小而準確,即選擇一個小的切入點,圍繞該切入點,盡可能測定所有緊密相關(guān)的數(shù)個指標,得出明確結(jié)論。然后在此前取得的研究結(jié)果基礎(chǔ)上,再設(shè)計新的研究,一步步穩(wěn)扎穩(wěn)打,把研究逐步推進,最后取得大的研究結(jié)果。
為了保證細胞穩(wěn)態(tài),細胞信號傳導、基因表達和代謝都呈現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)狀,相互影響相互補償。比如,H2O2含量,受到合成和降解代謝平衡的影響,催化合成的酶包括超氧化物岐化酶(SOD)和黃嘌呤氧化酶(XOD)等,催化降解的酶包括過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)和硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)等,當然也受到GPX和TPX需要的還原物質(zhì)(如還原型谷胱甘肽和還原型硫氧還蛋白)含量的影響,要闡明H2O2含量變化的原因,就必須測定上述幾種酶活性和相關(guān)底物的變化,才能得出明確的結(jié)論。

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