Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)促銷啦，快來選購

Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒，是一種基于WST-8（化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。

WST-8屬于MTT的升級產(chǎn)品，工作原理為：在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物（formazan）。顏色的深淺與細(xì)胞的增殖成正比，與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450nm波長處測定OD值，間接反映活細(xì)胞數(shù)量。

產(chǎn)品名稱：Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)

產(chǎn)品規(guī)格：500次

儲存條件:  4℃避光

使用操作說明

一. 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（測定細(xì)胞具體數(shù)量）

1、先用細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量，然后接種細(xì)胞到培養(yǎng)板內(nèi)。

2、按比例（例如：1/2比例）依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細(xì)胞濃度梯度，一般要做3-5個細(xì)胞濃度梯度，每個濃度建議

3-6個復(fù)孔。

3、接種后培養(yǎng)2-4小時使細(xì)胞貼壁，然后加CCK-8試劑培養(yǎng)一定時間后測定OD值，制作出一條以細(xì)胞數(shù)量為橫坐標(biāo)（X軸），OD值為縱坐標(biāo)（Y軸）的標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線可以測定出未知樣品的細(xì)胞數(shù)量（使用此標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提是實驗的條件要一致，便于確定細(xì)胞的接種數(shù)量以及加入CCK-8后的培養(yǎng)時間。）

二. 細(xì)胞活性檢測

1、在96孔板中接種細(xì)胞懸液（100 μL/孔）。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)一段時間（37℃,5% CO2）。

2、向每孔加入10 μL CCK-8溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數(shù)）。

3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時。

4、用酶標(biāo)儀測定在450 nm處的吸光度。

5、若暫時不測定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。24小時內(nèi)測定，吸光度不會發(fā)生變化。

三. 細(xì)胞增殖-毒性檢測

1、在96孔板中配制100 μL的細(xì)胞懸液。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時（37℃，5% CO2）。

2、向培養(yǎng)板加入10 μL不同濃度的待測物質(zhì)。

3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r間（例如：6、12、24或48小時）。

4、向每孔加入10 μL CCK-8溶液（注意不要再孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數(shù)）。

5、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時。

6、用酶標(biāo)儀測定在450 nm處的吸光度。

7、若暫時不測定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。24小時內(nèi)測定，吸光度不會發(fā)生變化。

細(xì)胞活力計算：
細(xì)胞活力*（％）=[A（藥物+）— A（空白）] / [A（藥物—）— A（空白）] ×1
A（藥物+）：具有細(xì)胞、CCK-8溶液和藥物溶液的孔的吸光度；
A（藥物—）：具有細(xì)胞、CCK-8溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度；
A（空白）：具有培養(yǎng)基和CCK-8溶液而沒有細(xì)胞的孔的吸光度。

*細(xì)胞活力：細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力