骨組織番紅固綠染液是一種用于骨組織切片的特殊染色液，主要用于區(qū)分骨組織中的不同成分，如骨基質(zhì)、軟骨和膠原纖維。番紅（Safranin O）和固綠（Fast Green）是兩種常用的染料，能夠分別染色軟骨和骨基質(zhì)，從而在顯微鏡下清晰顯示骨組織的結(jié)構(gòu)。

染色步驟

脫蠟和水化：

將石蠟包埋的骨組織切片依次放入二甲苯、乙醇梯度（100%、95%、80%、70%）和蒸餾水中進(jìn)行脫蠟和水化。

番紅染色：

將切片浸入番紅染液中，染色5-10分鐘。

用蒸餾水輕輕沖洗，去除多余染料。

分化：

使用70%乙醇進(jìn)行分化，直至軟骨組織呈現(xiàn)紅色，而骨基質(zhì)顏色變淺。

固綠染色：

將切片浸入固綠染液中，染色1-2分鐘。

用蒸餾水輕輕沖洗，去除多余染料。

脫水：

將切片依次放入乙醇梯度（70%、80%、95%、100%）中進(jìn)行脫水。

透明和封片：

將切片放入二甲苯中透明，然后使用中性樹膠封片。

染色結(jié)果

軟骨：紅色（番紅染色）

骨基質(zhì)：綠色（固綠染色）

膠原纖維：綠色（固綠染色）

注意事項(xiàng)

染色時(shí)間：染色時(shí)間需根據(jù)切片厚度和組織類型適當(dāng)調(diào)整。

分化控制：分化步驟是關(guān)鍵，需在顯微鏡下觀察，避免過度分化。

染料保存：番紅和固綠染液應(yīng)避光保存，避免反復(fù)凍融。

廢物處理：使用后的染液和有機(jī)溶劑應(yīng)按照化學(xué)廢棄物處理規(guī)范進(jìn)行處置。