信帆科普-ELISA和生化檢測樣本準(zhǔn)備要求和說明
項(xiàng)目介紹
1. 酶聯(lián)免疫(ELISA)檢測
利用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)定量目標(biāo)抗原或抗體含量。此方法靈敏度高,特異性強(qiáng),適合多種分泌型蛋白及細(xì)胞因子的測定。
2. 生化檢測
適用于血清蛋白質(zhì),常見酶類,體內(nèi)小分子代謝產(chǎn)物的測定。比如手動生化抗氧化指標(biāo)SOD,MDA,GSH-PX等。優(yōu)點(diǎn):檢測面廣,可檢測動物血液組織,各種體液。上機(jī)生化:肝腎功能,血脂血糖等。優(yōu)點(diǎn):應(yīng)用全自動生化分析儀檢測,大樣本盤,反應(yīng)恒溫,有標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品,結(jié)果準(zhǔn)確,檢測迅速。
3. 全自動動物血細(xì)胞分析
多達(dá)13 種動物檢測模式,可檢測21 項(xiàng)參數(shù), 全自動操作, 細(xì)胞信號全數(shù)字化處理技術(shù),每種動物設(shè)有各自獨(dú)立的專用測量系統(tǒng) 。
生化樣本準(zhǔn)備方法及要求:
以下所有樣本必須盡量新鮮!
1、動植物組織樣本(干冰運(yùn)輸)
準(zhǔn)確稱取動物組織重量按重量(mg):體積(μL)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,研磨儀勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000rpm/min,離心10min,取上清液進(jìn)行測定。
2、血清樣本(干冰運(yùn)輸)
全血標(biāo)本請于室溫放置2h內(nèi)或4℃過夜后于4℃ 3000rpm/min離心15min,取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝,并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測。
3、血漿樣本(干冰運(yùn)輸)
1.生化、ELISA:可用肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于4℃ 3000rpm/min離心15min,取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝,并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測。
2.凝血四項(xiàng):抽取靜脈血,按照9份靜脈血、1份抗凝劑的比例加入到3.8%(或3.2%)的枸櫞酸鈉抗凝管中,輕輕顛倒10次使之充分混勻,不得有凝塊,不得形成泡沫。
3.采樣后應(yīng)盡快分離血漿(60分鐘內(nèi)進(jìn)行),將標(biāo)本以3000rpm/min離心10-15min,使血漿分層,取上層血漿。
4.分離后的血漿-20℃以下密封可保存2周。干冰運(yùn)輸。
4、細(xì)胞樣本
貼壁細(xì)胞:將細(xì)胞用PBS沖洗2次后,用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來,將培養(yǎng)液3000rpm/min,離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀,干冰運(yùn)輸。
懸浮細(xì)胞:將培養(yǎng)液3000rpm/min,離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀,干冰運(yùn)輸。
細(xì)胞上清:標(biāo)本于4℃,3000rpm/min離心15min取上清,上清立即用于實(shí)驗(yàn),或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。
5、全血樣本(4℃運(yùn)輸)
EDTA抗凝管取適量抗凝全血。EDTA與血液最佳比例為1.5mg:1mL,樣本量不可太多或太少,取樣后上下輕輕顛倒幾次使血液與抗凝劑充分混勻。4℃運(yùn)輸,不可與冰袋直接接觸,不可猛烈撞擊?鼓獌H用于血常規(guī)檢測,不可運(yùn)輸后再離心取血漿。
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